Сравнительный анализ методов определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Часть 2

1  2

---

ГЛАВА 2. РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Описание базы практики

 

Работа выполнялась на базе ГБУЗ «ГКБ № 81 им. В. В. Вересаева ДЗМ» и ФГБУ НМИЦ гематологии Минздрава России

Материалом для исследования служила капиллярная и венозная кровь. Венозная кровь доставляется в вакуумных пробирках, регистрируется в единую лабораторную базу данных.

В практике КДЛ применяются следующие методы определения СОЭ:

1. метод Панченкова;
2. метод Вестергрена и его модификации;
3. Анализатор СОЭ

 

2.2 Метод Панченкова

 

Панченкова метод (Т.П. Панченков) — метод определения скорости оседания эритроцитов, при котором для забора и разведения крови, а также для измерения величины показателя используют одни и те же градуированные капиллярные пипетки, а для предотвращения свертывания крови применяют 5% трехзамещенный цитрат натрия (лимоннокислый натрия)  в соответствии с рисунком 1:

Рисунок 1

На пипетке, внутренний диаметр которой составляет около 1 мм, имеется 100 делений, помеченных цифрами от 0 (на верхнем конце) до 100 (на нижнем). Около метки 0 на пипетке имеется буква К (кровь), а около метки 50, т. е. посередине пипетки, — буква Р (реактив). Расстояние между двумя соединениями делений равно 1 мм. Капилляры представлены на рисунке 2:

Рисунок 2

Штатив Панченкова должен располагаться на ровной поверхности в соответствии с рисунком 3:

Рисунок 3

При постановке СОЭ методом Панчекнова  соотношение реактива и крови должно быть 1:4, т. е. к одному объему реактива следует прибавить четыре таких же объема крови.

 

2.3. Алгоритм определения СОЭ по методу Панченкова

 

• Капилляр Панченкова промыть раствором цитрата натрия.
• Набрать раствор цитрата до метки «Р» и выдуть на дно пробирки.
• Тем же капилляром набирать 2 раза кровь из пальца сплошным столбиком, без пузырьков воздуха до метки «К» и внести ее в пробирку с отмеренным раствором цитрата натрия. (разведение крови 1:4)
• Тщательно перемешать кровь с цитратом натрия.
• Набирать смесь до метки «О» без пузырьков воздуха.
• Капилляр установить в штатив в вертикальном положении
• Отметить время установки капилляра.
• Величину оседания, определить по столбику плазмы над осевшими эритроцитами через 1 час
• Ответ записать как величину СОЭ в миллиметрах в час (мм/ч) в бланк исследования.

Достоинства метода:

• доступность;
• простота использования;
• не требует дорогостоящего оборудования;
• не требует отдельного помещения;

Отсутствие необходимости венепункции (нужно 200 мкл крови);

Может использоваться как стабилизированная антикоагулянтом капиллярная, так и венозная кровь;

Недостатки метода:

• плохая стандартизация производимых промышленностью капилляров;
• необходимостью использовать для анализа только капиллярную кровь;
• капилляр плохо отмывается при многократном применении;
• много физических и химических факторов влияет на результат.

Метод Панченкова – это наиболее распространенный способ определения скорости оседания эритроцитов. Этот способ выгодно отличается от других существующих тем, что требует незначительного количества крови, которая добывается из мякоти пальца при помощи обычного укола иглой

В последние годы метод Панченкова стал применяться для определения СОЭ венозной крови, несмотря на то, что никаких научно-практических исследований по референтным величинам для этого метода, по изучению влияния различных факторов при исследовании венозной крови проведено не было.

Поэтому метод Панченкова в настоящее время является источником ошибочных результатов и проблем в работе КДЛ и деятельности врачей-клиницистов, не используется в других странах (кроме стран бывшего СССР) и должен быть исключен из практики лабораторий[5].

 

2.4 Метод Вестергрена

 

Наиболее широкое распространение в развитых странах мира для определения СОЭ получил метод Вестергрена, который с 1977 года рекомендован Международным Советом по Стандартизации в гематологии для применения в клинической практике.

В классическом методе Вестергрена используют стандартные капилляры из стекла или пластика длиной 300 мм ± 1,5 мм (рабочей является длина капилляра 200 мм), диаметром – 2,55 мм ± 0,15 мм, что повышает чувствительность метода, штатив для постановки, капилляр и пробирка для забора представлены на рисунке 7,8.

Время измерения – 1 ч. Для анализа может быть использована как венозная, так и капиллярная кровь [4].

Кровь может 2 часа храниться при комнатной температуре и 6 часов в холодильнике — это не влияет на результаты исследования; Опускание столбика эритроцитов на 2 мм соответствует значению 1 мм в час, то есть метод более точен, по сравнению с Панченкова; При одном проколе вены можно взять кровь на несколько анализов, в том числе и на СОЭ.

Определения СОЭ методом Вестергрена с капиллярной кровью

Произвести забор крови в микровету Вестергрена; манипуляция представлена на рисунке 4

Рисунок 4

Вставить в микровету капилляр Вестергрена и установить в штатив Вестргрена для капиллярной крови в соответствии с рисунком 5:

Рисунок 5

Через 1 ч измерить СОЭ по высоте столба прозрачной плазмы

Вместе с тем, необходимо понимать, что классический метод Вестергрена имеет целый ряд модификаций, сущность которых состоит в уменьшении длины капилляра (например, используются моноветты или вакуумные пробирки с раствором натрия цитрата рабочая длина которых составляет 120 мм, а не 200 мм, как в классическом методе Вестергрена), изменении угла установки капилляра (например, ряд фирм использует установку вакуумных пробирок под углом 18°), укорочении времени для наблюдения за оседанием эритроцитов (до 30–18 мин) или сочетании этих изменений. Насколько такие модификации можно называть методом Вестергрена в научной литературе не решен. [12]

 

2.5 Автоматизированный метод

 

В КДЛ ГБУЗ «ГКБ № 81 им. В. В. Вересаева ДЗМ» используется СОЭ-метр компании ALIFAX, основанный на определении агрегационной способности эритроцитов путем измерения оптической плотности в соответствии с рисунком 6

Рисунок 6

Последняя модель анализатора TECT1 THL – оснащена новой версией программного обеспечения, которая позволяет использовать новые латексные контроли

Контрольные материалы: турбодиметрические стандарты.

Новые контрольные материалы для анализаторов ТЕСТ1 – это готовые к использованию турбодиметрические стандарты, представляющие собой водные растворы синтетических латексных частиц трех разных концентраций (по 3 мл каждый).

Каждый уровень характеризуется определенными значениями мутности, на основании которых анализатор определяет оптические параметры, коррелирующие со значениями СОЭ.

Для выполнения данного контрольного теста используется та же процедура, что и для анализа проб пациентов.

Основные возможности и характеристики:

• Считывание пробы 1000 раз в течение 20 секунд линейным сенсором (измерение кинетики) ;
• Получение первого результата через 5 минут (последующие через каждые 24 секунды);
• Объем пробы 175 мкл (цельная кровь с ЭДТА). Работа с первичными пробирками;
• Загрузка до 60 образцов, пропускная способность – до 180 в час;
• Совместимость с ЛИС;
• Термостат на 37°С;
• Низкий уровень гематокрита не влияет на результат;
• Встроенный сканер штрих-кода, термический принтер;
• Корреляция с методом Вестергрена 90-99%;
• Для проведения тестов необходимы смарт-карты. Контроль качества:
• Контроль функциональных возможностей считывающих датчиков во время каждой промывки.
• Внутренний статистический контроль качества, основанный на постоянном усреднении результатов измерения проб пациентов.
• Новые трехуровневые латексные внешние контроли качества.

 

2.6 Ошибки при выполнении анализа СОЭ

 

На результаты определения СОЭ методом Панченкова и классическим методом Вестергрена могут оказывать существенное влияние ряд факторов преаналитического и аналитического этапов (не связанных с заболеванием пациента) производства лабораторных анализов:

• Температура в помещении где проводится анализ (повышение температуры в помещении на 1 °С увеличивает СОЭ на 3%);
• Время хранения пробы (не более 4 ч при комнатной температуре);
• Используемый антикоагулянт (рекомендован цитрат натрия);
• Правильная вертикальность установки капилляра;
• Длина капилляра;
• Внутренний диаметр капилляра;
• Степень разведения крови антикоагулянтом (рекомендуемое разведение 4:1);
• Величина гематокрита. Низкие значения гематокрита (35%) могут вносить искажения.

Метод определения СОЭ сложен для стандартизации, что затрудняет внедрение новых способов измерения.

Использование автоматических систем, показывающих удовлетворительную корреляцию с методом Вестергрена, позволило улучшить воспроизводимость, снизить влияние некоторых внешних факторов, увеличить производительность выполнения метода. И хотя определение СОЭ не относится к группе экспресс-тестов, желание врачей получить результат в более короткие сроки вполне оправдано.

 

2.7 Сравнение полученных результатов

 

В период прохождения производственной практики по ПМ.02 «Проведение лабораторных гематологических исследований» в декабре 2018 г. в ГКБ № 81 им. В.В. Вересаева нами было проведено сравнительное исследование показателей СОЭ выполненных разными методами (таблица 2)

Таблица 2 — Результаты СОЭ

 

Вывод по табличке

При сравнении результатов определения СОЭ различными методами (методом Панчекнова и автоматизированным) видно, что результаты достаточно близки.

Выводы по практической части:

1. Необходимо отметить, что, рассмотренные два метода, метод Вестергрена и его автоматизированная модификация и метод Панченкова выполнение этих методик требует особого внимания, ведь для исследований нужно соблюдать четкое выполнение правил анализа с использованием современных разработок, не только улучшающих качество результатов теста, но и существенно повышающих безопасность пациента и персонала при взятии проб крови. Сравнение методов показывает разницу в результатах.
2. Метод Панченкова трудоемок и сложен в исполнении. Автоматизированная модификация метода Вестергрена более предпочтительна, т. к. исключено влияние факторов окружающей среды, отсутствуют возможные ошибки на аналитическом этапе.

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

 

В заключение необходимо заметить, что, несмотря на широкое применение в клинической практике, определение СОЭ имеет ограниченное диагностическое значение.

Вместе с тем, большинство авторитетных экспертов в области клинической медицины, однозначно указываю на то, что диагностические возможности этого метода используются далеко не полностью, и основная проблема для практики отечественных КДЛ лежит в плоскости методических особенностей постановки теста.

Исследование СОЭ имеет практически вековую историю и за это время возник ряд модификаций этого исследования.

Представленные два метода, метод Панченкова и метод Вестергрена для определения СОЭ, очень нужные методы, ведь с помощью них можно подтвердить различные воспаления.

Но нужно быть внимательным, ведь для исследований нужно соблюдать  четкое выполнение  правил анализа с использованием современных разработок, не только улучшающих качество результатов теста, но и существенно повышающих безопасность пациента и персонала при взятии проб крови.

На результаты СОЭ полученные методом Панченкова влияет ряд факторов, температура окружающей среды, отсутствие прямых солнечных лучей, качество цитрата натрия, четкое соотношение крови и антикоагулянта, разница во времени постановки первого и последнего капилляра.

Данную методику невозможно стандартизировать и провести контроль качества.

Таким образом, изучив научную литературу по теме, проведя анализ СОЭ методом Панченкова и Вестергрена, сравнив результаты проведенных исследований, рассмотрев недостатки и достоинства выбранных методов, задачи исследования были выполнены, цель работы достигнута.

Рекомендации

1) Медицинскому лабораторному технику рекомендуется при работе строго придерживаться установленных методик.

2) при постановке СОЭ методом Панченкова рекомендуется пользоваться созданным фотоалгоритмом

 

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

 

1. Абрамов М.Г. Гематологический атлас. – М., 2004 – 230с.
2. Алимова Е.К. Морфологическому составу и биохимические показатели крови. Ростов н/Д, 2002– 84с.
3. Атлас клеток крови и костного мозга / Под ред. Г.И Козинца. – М.,2001. – 150с.
4. Блиндарь В.М. Гематологические методы исследования. Клиническое значение показателей крови. Руководство для врача.-М.: Медицинское информационное агентство, 2013 – 96с
5. Камышников В.С. Клиническая лабораторная диагностика. М.: МЕД-пресс-информ, 2015 – 720 с.
6. Камышников В.С. Норма в лабораторной медицине: Справочник/ В.С.Камышников. – М. : МЕДпресс-информ, 2014. – 336 с.
7. Луговская С.А. Лабораторная гематология / С.А. Луговская., М.Е. Почтарь., В.Т. Морозова., В.В. Долгов Москва.: 2012. – 304 с
8. Луговская С.А., Долгов В.В. Лабораторная Гематология. Тверь, Триада, 2014. Ст. 21-34. (137-140)
9. Панченков Т.П. Определение оседания эритроцитов при помощи микрокапилляра // Врач. дело. – 2000.
10. Руководство по гематологии / Под ред. А.И. Воробьева. – М., 2003.
11. Справочник заведующего КДЛ, №2, стандартизация метода измерения СОЭ 2019-32 с.
12. https://vuzlit.ru/2193179/metod_vestergrena
13. http://www.ramld.ru/userfiles/file/Moscow2009/kishkuncmt.pdf
14. http://studepedia.org/index.php?vol=1&post=6175
15. https://st истинный ревматизм;
16. net/preview/2415531/page:4/

---

1  2